Ocorrência de sorogrupos/sorovares de Leptospira spp. em cães com suspeita clínica de leptospirose em Santa Maria ­ RS / Occurrence of serogroups/serovars of Leptospira spp. in dogs with clinical suspicion of leptospirosis in Santa Maria ­ RS

A leptospirose é uma zoonose de distribuição mundial que pode acometer cães e ser altamente letal para a espécie. No Brasil, tal enfermidade tem caráter endêmico na espécie canina e configura-se como um sério problema de saúde pública. Objetivou-se verificar a ocorrência dos sorogrupos/sorovares de Leptospira spp. que mais acometem cães com suspeita clínica de leptospirose na cidade de Santa Maria ­ RS, Brasil, analisando sua titulação de anticorpos. No estudo, utilizou-se os laudos dos exames de soroaglutinação microscópica (SAM) para leptospirose de 218 cães provenientes da cidade de Santa Maria ­ RS durante o período de janeiro de 2015 a dezembro de 2019. Todos os laudos foram emitidos pelo Laboratório de Leptospirose (LabLepto - UFSM). Das 218 amostras de soro processadas nos cinco anos, 101 (46,33%) resultaram positivas para, pelo menos, um sorogrupo/sorovar testado. Este estudo demonstrou maior ocorrência do sorogrupo Icterohaemorrhagiae (53,37%) contemplado pelas sorovares Copenhageni e Icterohaemorrhagiae, com 49 (30,06%) e 38 (23,31%) soros reagentes, respectivamente. As titulações variaram de 100 a 6400, sendo que a mais recorrente encontrada nas amostras deste estudo foi 100, representando 47,85% dos títulos de anticorpos. Os dados obtidos neste estudo são de grande valia para o conhecimento dos sorogrupos/sorovares circulantes na região e sua epidemiologia podendo, inclusive, auxiliar para futuras formulações vacinais considerando sorogrupos/sorovares mais frequentemente detectados, contribuindo, assim, com a saúde pública.

Leptospirosis is a worldwide distribution zoonosis that can affect dogs and be highly lethal for the species. In Brazil, this disease is endemic in the canine species and represents a serious public health problem. The aim of this study was to verify the occurrence of Leptospira spp. that most affect dogs with clinical suspicion of leptospirosis in the city of Santa Maria ­ RS, Brazil, analyzing their antibody titers. In the study, we used the reports of microscopic agglutination tests (MAS) for leptospirosis in 218 dogs from the city of Santa Maria - RS during the period from January 2015 to December 2019. All reports were issued by the Leptospirosis Laboratory (LabLepto - UFSM). Of the 218 serum samples processed over the five years, 101 (46.33%) were positive for at least one serogroup/serovar tested. This study showed a higher occurrence of serogroup Icterohaemorrhagiae (53.37%) covered by serovars Copenhageni and Icterohaemorrhagiae, with 49 (30.06%) and 38 (23.31%) reagent sera, respectively. The titers ranged from 100 to 6400, and the most recurrent found in the samples in this study was 100, representing 47.85% of the antibody titers. The data obtained in this study are of great value for understanding the serogroups/serovars circulating in the region and their epidemiology, and may even contribute to future vaccine formulations considering the most frequently detected serogroups/serovars, thus contributing to public health.

Detection of Sarcocystis spp. and Toxoplasma gondii in swine and detection of DNA of these protozoa in tissues and sausages / Soroprevalência de Sarcocystis spp. e Toxoplasma gondii em suínos e detecção do DNA desses protozoários em tecidos e embutidos

Abstract The seroprevalence of Sarcocystis spp. and Toxoplasma gondii was researched in swine raised in Santa Maria, RS, Brazil. Serum samples from 84 pigs from 31 farms were tested using indirect immunofluorescence assay (IFA) for both agents. Additionally, 53 samples of pork sausages and tissues destined for human consumption, including: salami, sausage, black pudding, heart, tongue, brain, and rib muscle, were submitted to PCR to detect DNA for each agent. The frequency of anti-Sarcocystis spp. antibodies was 36.9% (31/84), with titers ranging from 32 to 1024, and 25% (21/84) for anti-T. gondii antibodies, with titers ranging from 64 to 2048. Sarcocystis spp. and T. gondii DNA were detected in 67.9% (36/53) and 13.2% (7/53) of samples, respectively. The presence of antibodies and the detection of DNA from Sarcocystis spp., and T. gondii suggests that the pigs were infected and may serve as an important reservoir for both parasites. The infection by these protozoa in the swine population is relevant to public health due to their zoonotic potential.

Resumo A soroprevalência de Sarcocystis spp. e Toxoplasma gondii foi pesquisada em suínos criados em Santa Maria, RS, Brasil. Amostras de soro de 84 suínos de 31 fazendas foram testadas pela reação deimunofluorescência indireta (IFA) para ambos os agentes. Adicionalmente, 53 amostras de embutidos suínos e tecidos cárneos destinados ao consumo humano, incluindo: salame, linguiça, morcela, coração, língua, cérebro e músculo da costela foram submetidas à PCR para detecção de DNA para cada agente. A frequência de anticorpos anti-Sarcocystis spp. foi de 36,9% (31/84), com títulos variando de 32 a 1.024; e 25% (21/84) para anticorpos anti-T. gondii, com títulos variando de 64 a 2048. A presença de DNA de Sarcocystis spp. e T. gondii foi detectada em 67,9% (36/53) e 13,2% (7/53) das amostras avaliadas, respectivamente. A detecção de anticorpos e DNA de Sarcocystis spp. e T. gondii sugere que os suínos foram infectados e podem servir como um importante reservatório de ambos os parasitas. A circulação desses agentes na população suína é relevante para a saúde pública devido ao seu potencial zoonótico.

In vitro lytic efficiency of Staphylococcus aureus bacteriophages in bacteria from bovine mastitis: a meta-analysis / Eficiência lítica in vitro de bacteriófagos de Staphylococcus aureus em bactérias de mastites bovina: uma meta-análise

ABSTRACT: Bacteriophages have been investigated as alternative to the treatment of bacterial infections, including bovine mastitis, in production animals. In this meta-analysis, we evaluated in vitro efficiency of phages of Staphylococcus aureus against S. aureus, which is involved in the etiology of bovine mastitis. Seventeen studies were included and the bacterial lytic activity was extracted using proportion analysis. The lytic efficiency of phages was obtained in this meta-analysis using a random-effects model [significant difference (P<0.05)]. Forest plots were used to graphically represent the efficiency of phages on bacterial isolates. Most phages (e.g., CS1, DW2, ΦSA011, ΦSA012, ΦSA022, ΦSA023, ΦSA024, ΦSA025, ΦSA037, ΦSA038, ΦSA039, ΦSA041, ΦSA042, ΦSA043, ΦSA044, MSA6, Ufv-aur2 to Ufv-aur11, SAH-1, SPW, vB_SauM_JS25, SaPh1 to SaPh6, SA, SANF, SA2, ΦSA012, ΦSA039, phi11, phiIPLA88, phiIPLA35, phiIPLA-RODI, phiIPLA-C1C, SAJK-IND, vBSP-A1, vBSP-A2, STA1.ST29, EB1.ST11, EB1.ST27, Remus, and ISP) were efficiently lytics or infected most S. aureus isolates, demonstrating 80% (P<0.05) lytic efficiency. The phages SA, SANF and SA2, also demonstrated lytic activity or infected the non-Staphylococcus aureus and Macrococcus caseolyticus isolates. In this meta-analysis, we compared and demonstrated the in vitro efficiency and host range of S. aureus phages. Additionally, the phages represent an alternative to be researched to treat bovine mastitis in dairy cattle caused by the prevalent microorganism, S. aureus.

RESUMO: Os bacteriófagos têm sido investigados como alternativa ao tratamento de infecções bacterianas em animais de produção, incluindo a mastite bovina. Nesta meta-análise, avaliamos a eficiência in vitro de fagos de Staphylococcus aureus contra S. aureus envolvidas na etiologia da mastite bovina. Dezessete estudos foram incluídos e a atividade lítica bacteriana foi extraída usando análise de proporção. A eficiência lítica dos fagos foi obtida nesta meta-análise, usando um modelo de efeitos aleatórios (diferença significativa (P <0,05)). Os gráficos de Forest plots foram usados para representar graficamente a eficiência dos fagos em isolados bacterianos. Os fagos avaliados, na sua grande maioria, (por exemplo, CS1, DW2, ΦSA011, ΦSA012, ΦSA022, ΦSA023, ΦSA024, ΦSA025, ΦSA037, ΦSA038, ΦSA039, ΦSA041, ΦSA042, ΦSA043, ΦSAf e U0f, ua04 SPW, vB_SauM_JS25, SaPh1 a SaPh6, SA, SANF, SA2, ΦSA012, ΦSA039, phi11, phiIPLA88, phiIPLA35, phiIPLA-RODI, phiIPLA-C1C, SAJK-IND, vBSP-A1, vBSP-A2, STA1.ST29, EB1.ST11, EB1.ST27, Remus, e ISP) foram eficientemente líticos ou infectaram a maioria dos isolados de S. aureus, demonstrando 80% (P < 0,05) de eficiência lítica. Os fagos SA, SANF e SA2 também demonstraram atividade lítica ou infectaram os isolados Staphylococcus não-aureus e Macrococcus caseolyticus. Nesta meta-análise, comparamos e demonstramos a eficiência in vitro e gama de hospedeiros de fagos de S. aureus. Adicionalmente, os fagos representam uma alternativa a ser pesquisada para o tratamento da mastite bovina em gado leiteiro causada pelo microrganismo prevalente, ou seja S. aureus.

Occurrence of Leptospira spp. and factors associated with the infection in horses from a military contingent in the Rio Grande do Sul State, Brazil / Ocorrência de Leptospira spp. e fatores associados à infecção em equinos de contingente militar no estado do Rio Grande do Sul, Brasil

The seroprevalence of Leptospira spp. and infection risk factors were investigated in horses from a military contingent in the Rio Grande do Sul State, Brazil. A total of 446 horses were evaluated and categorized into 309 mares, 11 stallions, and 126 horses with an average age of three years. To determine seroprevalence, serum samples from all horses were submitted to the microscopic agglutination test against 12 serovars belonging to nine serogroups, usually circulating in equine populations. To investigate the possible risk factors of infection by Leptospira spp., questionnaires were applied in that military unit. The seroprevalence in the horses with an average age of 3 years, mares, and stallions were 57.94% (73/126), 54.05% (165/309), and 45.45% (5/11), respectively. The main risk factors identified were contact with different water sources, the presence of rodents, and contact with wild and domestic animals. The high seroprevalence of anti­Leptospira spp. antibodies may be associated with the presence of these risk factors. Therefore, the exposure of horses to possible reservoirs of Leptospira spp. should be minimized. Also, the immunoprophylaxis protocol should be reviewed and a shorter interval between vaccinations adopted to control leptospirosis in this herd.(AU)

A soroprevalência de Leptospira spp. e os fatores de risco para infecção foram investigados em cavalos de um contingente militar no Rio Grande do Sul, Brasil. Um total de 446 cavalos foram avaliados e categorizados em 309 éguas, 11 garanhões e 126 cavalos com idade média de três anos. Para determinação da soroprevalência, amostras de soro de todos os equinos foram submetidas ao teste de aglutinação microscópica contra 12 sorovares pertencentes a nove sorogrupos, normalmente circulantes em populações equinas. Para investigar os possíveis fatores de risco da infecção por Leptospira spp., foi aplicado um questionário naquela unidade militar. A soroprevalência nos cavalos com idade média de três anos, éguas e garanhões foi de 57,94% (73/126), 54,05% (165/309) e 45,45% (5/11), respectivamente. Os principais fatores de risco identificados foram o contato com diferentes fontes de água, a presença de roedores e o contato com animais silvestres e domésticos. A alta soroprevalência de anticorpos anti­Leptospira spp. pode estar associada à presença desses fatores de risco. Portanto, a exposição destes equinos aos possíveis reservatórios de Leptospira spp. deve ser minimizada. Além disso, o protocolo de imunoprofilaxia deve ser revisto e, possivelmente, um menor intervalo entre as vacinas deve ser adotado para o controle da leptospirose neste plantel.(AU)

Imported hepatopulmonary echinococcosis: first report of Echinococcus granulosus sensu stricto (G1) in Bolivia

Abstract Hepatopulmonary hydatidosis in young children is a rare and atypical presentation of Echinococcus granulosus infection. We report the first case of cystic echinococcosis caused by a microvariant of E. granulosus sensu stricto. Chemotherapy and systemic corticoids were administered before curative surgery was performed. Recurrence was not observed for more than 24 months of follow-up.

Exposure of Toxocara canis eggs to Purpureocillium lilacinum as a biocontrol strategy: an experimental model evaluation / Exposição de ovos de Toxocara canis a Purpureocillium lilacinum como estratégia de biocontrole: uma avaliação em modelo experimental

Abstract Purpureocillium lilacinum is a nematophagous fungus used in biological control against some parasites, including Toxocara canis. This study researched the infectivity of embryonated T. canis eggs after exposure to the fungus P. lilacinum. T. canis eggs were exposed to P. lilacinum for 15 or 30 days and subsequently administered to Swiss mice (n=20). Control group consisted of mice who received T. canis embryonated eggs without fungal exposure. Forty-eight hours after infection, heart, lung, and liver from animals of each group were collected to assess larval recovery. The organs of mice that received embryonated eggs exposed to the fungus showed a lower average larval recovery (P<0.05) suggesting that exposure of T. canis eggs to P. lilacinum was able to reduce experimental infection. Under the evaluated conditions, the interaction time between the fungus and the parasite eggs was not a significant factor in larvae recovery. P. lilacinum may be considered a promising T. canis biological control agent. However, further studies are needed to determine a protocol for the use of this fungus as a biological control agent.

Resumo Purpureocillium lilacinum é um fungo nematófago com potencial para uso no controle biológico de parasitos, incluindo Toxocara canis. Este estudo pesquisou a infectividade de ovos de T. canis embrionados após exposição ao fungo P. lilacinum . Ovos de T. canis foram expostos ao fungo por 15 ou 30 dias e subsequentemente administrados a camundongos Swiss (n=20). O grupo controle consistiu de camundongos que receberam ovos embrionados do parasita sem exposição ao fungo. Quarenta e oito horas após a infecção, coração, pulmão e fígado dos camundongos foram coletados para avaliar a recuperação larval. Os órgãos dos animais que receberam ovos embrionados expostos ao fungo apresentaram menor média de recuperação larval (P<0,05) do que os infectados com ovos sem exposição ao fungo, sugerindo que a exposição dos ovos de T. canis a P. lilacinum foi capaz de reduzir a infecção experimental. Nas condições avaliadas, o tempo de interação entre o fungo e os ovos do parasito não foi um fator significativo na recuperação das larvas. P. lilacinum pode ser considerado um promissor agente de controle biológico de T. canis, no entanto, mais estudos são necessários para avaliar o emprego deste fungo como um agente de controle biológico.

Genotyping of South American clinical isolates of Pythium insidiosum based on single nucleotide polymorphism-based multiplex PCR / Genotipagem de isolados clínicos de Pythium insidiosum da América do Sul utilizando polimorfismos de nucleotídeo único baseado em PCR multiplex

ABSTRACT: We aimed to genotype the South American clinical isolates of Pythium insidiosum using the single nucleotide polymorphisms (SNP) of the ribosomal DNA sequences (rDNA). Previously, an SNP-based multiplex-PCR was able to distinguish three different clades of P. insidiosum isolates. Thus, we used this assay to evaluate South American clinical isolates of P. insidiosum (n=32), standard strains from Costa Rica (n=4), Thailand (n=3), Japan (n=1), and India (n=1), a standard strain of Pythium aphanidermatum, and Brazilian environmental isolates of Pythium torulosum, Pythium rhizo-oryzae and Pythium pachycaule voucher (n=3). It was possible to allocate each American P. insidiosum isolate to clade I, the isolates of India, Japan, and Thailand to clade II, and the Thai isolate to clade III. P. aphanidermatum, P.torulosum, P.rhizo-oryzae and P.pachycaule voucher isolates were not amplified. For the first time, a P. insidiosum isolate from Uruguay, South America, was included in molecular analyzes. By SNP-based multiplex-PCR, it was possible to perform the identification and genotyping of the South American isolates of P. insidiosum, demonstrating similar genetic characteristics of these isolates.

RESUMO: O objetivo deste estudo foi genotipar isolados clínicos de Pythium insidiosum da América do Sul utilizando polimorfismos de nucleotídeo único (SNP) de sequências de rDNA. Anteriormente, um multiplex-PCR baseado em SNP foi capaz de distinguir P. insidiosum em três diferentes clados. Dessa forma, utilizamos este método para avaliar isolados clínicos de P. insidiosum da América do Sul (n=32), cepas padrão da Costa Rica (n=4), Tailândia (n=3), Japão (n=1) e Índia (n=1), uma cepa padrão de Pythium aphanidermatum e isolados ambientais brasileiros de Pythium torulosum; Pythium rhizo-oryzae e Pythium pachycaule voucher (n=3). Os isolados analisados foram alocados aos clados: I (americanos), II (isolados da Índia, Japão e Tailândia), e III (um isolado tailandês). P. aphanidermatum, P.torulosum, P.rhizo-oryzae e P.pachycaule voucher não foram amplificados. Pela primeira vez, um isolado de P. insidiosum do Uruguai foi incluído em análises moleculares. Através da multiplex-PCR baseada em SNP, foi possível realizar a identificação e genotipagem dos isolados sul-americanos de P. insidiosum, demonstrando características genéticas semelhantes entre esses isolados.

Biofilm formation by Prototheca zopfii isolated from clinical and subclinical bovine mastitis in distinct growth conditions under different dyes / Formação de biofilme por Prototheca zopfii isolados de mastite bovina clínica e subclínica em distintas condições de crescimento sob diferentes corantes

ABSTRACT: Prototheca spp. have been reported as an emergent environmental mastitis pathogen in several countries. Biofilm formation is a significant factor associated with different degrees of virulence developed by many microorganisms, including Prototheca spp. The present study aimed to compare two growth conditions and two staining dyes to determine which combination was more appropriate to evaluate qualitatively and quantitatively the production of biofilm by P. zopfii. Biofilm formation was evaluated in polystyrene microplates under static and dynamic growth conditions and staining with crystal violet or cotton blue dye. All P. zopfii isolates from cows with mastitis were classified as biofilm-producers in all growth conditions and staining. The cotton blue dye proved to be more appropriate method to classify the intensity of P. zopfii biofilm production.

RESUMO: Prototheca spp. tem sido relatado como um patógeno ambiental causador de mastite bovina em vários países. A formação de biofilme é um fator associado a diferentes graus de virulência desenvolvidos por muitos microrganismos, incluindo Prototheca zopfii. O presente estudo teve como objetivo comparar duas condições de crescimento e dois corantes para determinar a combinação mais adequada para avaliar qualitativa e quantitativamente a produção de biofilme por P. zopfii. A formação de biofilme foi avaliada em microplacas de poliestireno sob condições estáticas e dinâmicas de crescimento e coloração com cristal violeta ou azul de algodão. Todos os isolados de P. zopfii de vacas com mastite foram caracterizados como produtores de biofilme, independentemente das condições de crescimento e coloração. O corante azul de algodão demonstrou ser o método mais adequado para classificar a intensidade de produção de biofilme de P. zopfii.

Epidemiological, clinical and diagnostic aspects of sheep conidiobolomycosis in Brazil / Aspectos epidemiológicos, clínicos e de diagnóstico da conidiobolomicose ovina no Brasil

ABSTRACT: Conidiobolomycosis is an emerging disease caused by fungi of the cosmopolitan genus Conidiobolus. Particular strains of Conidiobolus coronatus, Conidiobolus incongruus and Conidiobolus lamprauges, mainly from tropical or sub-tropical origin, cause the mycosis in humans and animals, domestic or wild. Lesions are usually granulomatous and necrotic in character, presenting two clinical forms: rhinofacial and nasopharyngeal. This review includes the main features of the disease in sheep, with an emphasis on the epidemiology, clinical aspects, and diagnosis of infections caused by Conidiobolus spp. in Brazil. In this country, the disease is endemic in the Northeast and Midwest, affecting predominantly woolless sheep breeds and occasioning death in the majority of the studied cases. The species responsible for infections of sheep are C. coronatus and C. lamprauges and the predominant clinical presentation is nasopharyngeal. These fungal infections are very important, since they compromise the health status of the sheep flock and cause serious economic losses to the sheep industry. Thus, research is needed to investigate faster tools for diagnosis and effective methods for the control and treatment of conidiobolomycosis.

RESUMO: Conidiobolomicose é uma enfermidade emergente causada por fungos cosmopolitas do gênero Conidiobolus. Isolados de Conidiobolus coronatus, Conidiobolus incongruus e Conidiobolus lamprauges, principalmente de origem tropical e subtropical, afetam humanos, animais domésticos e silvestres. As lesões da conidiobolomicose normalmente são de caráter granulomatoso e necrótico, apresentando-se sob duas formas clínicas: rinofacial e nasofaríngea. O presente artigo tem como objetivo revisar as principais características da doença em ovinos, particularizando a epidemiologia, assim como os aspectos clínicos e o diagnóstico das infecções causadas por Conidiobolus spp. no Brasil. Neste País, a enfermidade é endêmica nas regiões nordeste e centro-oeste, afetando ovinos predominantemente de raças deslanadas, ocasionando a morte na grande maioria dos casos estudados. As espécies do fungo responsáveis pelas infecções em ovinos são C. coronatus e C. lamprauges e a forma clínica predominante é a nasofaríngea. Tais infecções fúngicas são muito importantes, uma vez que comprometem o status sanitário do rebanho ovino e acarretam sérios prejuízos econômicos à ovinocultura. Dessa forma, pesquisas são necessárias para investigar ferramentas rápidas de diagnóstico e métodos eficazes de controle e tratamento da conidiobolomicose.

Seroprevalence of Pythium insidiosum infection in equine in Rio Grande do Sul, Brazil / Soroprevalência da infecção por Pythium insidiosum em equinos no estado do Rio Grande do Sul

ABSTRACT: An epidemiological survey was carried out by performing an Enzyme Linked Immuno Sorbent Assay (ELISA) test to determine the seroprevalence of Pythium insidiosum infection in equine in Rio Grande do Sul State (RS), Brazil. The serological study covered seven geographical regions of RS, classified according to the Instituto Brasileiro de Geografia e Estatística (IBGE). The samples were obtained from official veterinary service (Serviço Veterinário Oficial, SVO) linked to the Secretaria da Agricultura, Pecuária e Agronegócio of RS (SEAPA-RS) to proceed the investigation of equine infectious anemia in 2014. Samples were collected during the months of September and October of 2013, covering the seven geographical regions of RS, and totalized 1,002 serum samples. The seroprevalence for P. insidiosum in RS was 11.1% (CI95% 9.23 to 13.22). The relative risk (RR) of the presence of antibodies anti-P. insidiosum was in the regions Southeast 11.17 (CI95%, 4.65 to 26.8), Porto Alegre 4.62 (CI95%, 1.70 to 12.55), Southwest 11.17 (CI95%, 4.65 to 26.8) and Northwestern 3.72 (CI95%, 1.52 to 9.09). The highest prevalence (69.1%) was observed in females with RR of 1.59 (CI95%, 1.11 to 2.27). When the presence of dams was evaluated, the seropositivity was evident in 74.4%, presenting an association of 2.13 (CI95%, 1.16 to 3.91) compared to farms without dams. In properties with veterinary assistance, the frequency of 72.7% and RR of 3.04 (CI95%,, 1,85 to 4,98) of seropositivity were observed. Due to the importance of pythiosis in horse herds, this study highlights the presence of anti-P. insidiosum antibodies in horses in RS, Brazil.

RESUMO: Um levantamento soroepidemiológico foi realizado através do teste de ELISA indireto para determinar a soroprevalência da infecção por Pythium insidiosum em equinos no estado do Rio Grande do Sul (RS), classificadas de acordo com o Instituto Brasileiro de Geografia e Estatística (IBGE). As amostras utilizadas eram provenientes do cadastro das propriedades do Serviço Veterinário Oficial (SVO), da Secretaria da Agricultura, Pecuária e Agronegócio do RS (SEAPA-RS), coletadas para o inquérito da anemia infecciosa equina de 2014. As coletas foram realizadas durante os meses de setembro e outubro de 2013, abrangendo as sete mesorregiões geográficas do RS, e totalizaram 1.002 amostras de soro. Do total das amostras testadas, 11.1% (CI95% 9.23 to 13.22) foram soropositivas para P. insidiosum. Constatou-se o risco relativo (RR) da presença de anticorpos anti-P. insidiosum nas regiões Sudeste 11,17(IC95%, 4,65-26,8), Porto Alegre 4,62 (IC95%, 1,70-12,55), Sudoeste 11,17 (IC95%, 4,65-26,8) e Noroeste 3,72 (IC95%, 1,52-9,09). Observou-se a maior soroprevalência (69,1%) em fêmeas com RR de 1,59 (IC95%, 1,11-2,27). Quanto à presença de açudes, evidenciou-se soropositividade em 74,4% das propriedades, apresentando associação de 2,13 (IC95%,1,16-3,91) em comparação com propriedades sem açude. Em propriedades com assistência veterinária, foi verificada a frequência de 72,7% e RR de 3,04 (IC95%,1,85-4,98). Diante da relevância da pitiose em rebanhos equinos, destaca-se a presença de anticorpos anti-P. insidiosum em equinos no estado do RS.

Isolation and molecular characterization of symbiotic fungus from Acromyrmex ambiguus and Acromyrmex heyeri ants of Rio Grande do Sul State, Brazil / Isolamento e caracterização molecular do fungo simbionte de formigas-cortadeiras (Acromyrmex heyeri e Acromyrmex ambiguus) do Rio Grande do Sul, Brasil

Leaf-cutting ants of the genera Atta and Acromyrmex determine serious agricultural problems and live on symbiosis with Leucoagaricus gongylophorus. The aim of this study is to identify morphological and molecularly, as well as to verify the genotypic variability of the symbiotic fungus cultivated by A. heyeri and A. ambiguus from three different regions of the state of Rio Grande do Sul, Brazil. Fungus gardens were collected and fragments of mycelia were grown in selective medium. Total DNA was extracted and amplification of the ITS region was performed by PCR using universal primers. After DNA sequencing, the chromatograms were assembled and phylogenetic analyzes were performed by the Neighbor-Joining method. A total of six isolates of L. gongylophorus were obtained and their identities were confirmed by molecular analyses. Phylogenetic analysis of the ITS region showed a tree with two distinct groups regarding the fungus isolates from A. heiyeri and A. ambiguous. In this study, it was verified that A. heyeri and A. ambiguous, cultivate the same fungus. Additionally, the molecular marker used in this study showed variations in L. gongylophorus, evidencing two distinct branches in the phylogenetic tree, according to the ant species that cultivate L. gongylophorus. However, other studies involving the inclusion of a great number of isolates of L. gongylophorus, as well as the use of other molecular markers to validate the possible variations in the phylogenetic relationship of this symbiotic fungus are required.

Formigas-cortadeiras dos gêneros Atta e Acromyrmex causam elevados prejuízos à agricultura e são dependentes obrigatórias da simbiose com Leucoagaricus gongylophorus. O objetivo deste estudo foi identificar morfologicamente e molecularmente, bem como verificar a variabilidade genotípica do fungo simbionte,cultivado por Acromyrmex heyeri e Acromyrmex ambiguus em três regiões do RS, Brasil. Jardins de fungo foram coletados do interior de formigueiros e fragmentos de micélio foram cultivados em meio de cultura seletivo. O DNA total foi extraído e a amplificação da região ITS foi realizada por PCR, utilizando primers universais. Após sequenciamento, os cromatogramas foram montados e as análises filogenéticas foram realizadas pelo método de Neighbor-Joining. Dos jardins de fungo, obtiveram-se seis isolados de L. gongylophorus, confirmados por análise molecular. A análise filogenética da região ITS mostrou uma árvore com dois grupos distintosem relação aos isolados do fungo oriundos de ninhos de A. heyeri e A. ambiguus. Neste estudo, evidenciou-se que as espécies de formigas A. heyeri e A. ambiguus cultivam o mesmo fungo. Entretanto, o marcador molecular estudado evidenciou variações de L. gongylophorus que permitiram formar duas ramificações diferentes na árvore filogenética relacionada à espécie de formiga que o cultiva. Todavia, para validar as possíveis variações nas relações filogenéticas deste fungo simbionte, é necessária a inclusão de um maior número de isolados de L. gongylophorus, bem como o emprego de outros marcadores moleculares.

Temporal profile of antimicrobial resistance exhibited by strains of Staphylococcus spp. isolated from cases of bovine mastitis for 20 years (1992-2011) / Perfil temporal da resistência antimicrobiana exibido por cepas de Staphylococcus spp. isoladas de casos de mastite bovina durante 20 anos (1992-2011)

Records of in vitro susceptibility tests performed between 1992 and 2011 were retrospectively reviewed in order to evaluate the dynamic profiles of possible changes in antimicrobial resistance of Staphylococcus spp. isolated from milk samples of cows with mastitis during two decades. The results of 2,430 isolates tested by disk diffusion technique for susceptibility to oxacillin, penicillin, ampicillin, cephalexin, norfloxacin, tetracycline, sulfazotrim, gentamicin, and neomycin were analysed. Comparisons were performed between the percentages of resistance to antimicrobials and their classes and also between the decades studied. Additionally, the possible tendency or changes in the behaviour of these pathogens against the major drugs used in the last two decades were evaluated using regression analysis. The highest rates of resistance (P<0.0001) were observed for the beta-lactams (34.3%), with exception of cephalexin (6.9%), and for the tetracyclines (28%). Similar resistance rates (7.6% to 15.7%) were observed among the other drugs. Regression analysis showed a reduction in resistance to penicillin and ampicillin throughout the period, whilst for oxacillin and neomycin a decrease in the resistance was observed during the first decade, followed by an increase. A trend towards decreased resistance was found for sulfazotrim, whereas for the other antimicrobials no decrease was observed. The results indicated no trend towards increased resistance for most antimicrobials tested. Nevertheless, it is necessary to monitor the resistance patterns of these pathogens in order to save these drugs as a therapeutic reserve.

Os registros de resultados de testes de suscetibilidade in vitro realizados no período de 1992 a 2011 foram revisados, retrospectivamente, a fim de avaliar a dinâmica de possíveis mudanças dos perfis de resistência de isolados de Staphylococcus spp., oriundos de amostras de leite de vacas com mastite ao longo do tempo. Os resultados de 2430 isolados testados pela técnica de difusão em disco para oxacilina, penicilina, ampicilina, cefalexina, norfloxacina, tetraciclina, sulfazotrim, gentamicina e neomicina foram analisados. Comparações entre as médias de resistência para os antimicrobianos e suas respectivas classes e em relação ao período analisado foram estabelecidas. O comportamento da resistência para cada antimicrobiano foi avaliado por meio de análise de regressão. As maiores taxas de resistência (P<0,0001) foram observadas para os betalactâmicos (34,3%), com exceção da cefalexina (6,9%), e tetraciclina (28%). Frente aos demais fármacos, os isolados apresentaram médias de resistência semelhantes entre si (de 7,6% a 15,7%). A análise de regressão demonstrou redução da resistência para penicilina e ampicilina ao longo do período analisado. Para a oxacilina e a neomicina, houve um decréscimo da resistência dos micro-organismos testados durante a primeira década; entretanto, houve um aumento no segundo período. Em relação ao sulfazotrim, foi verificada uma tendência à diminuição da resistência dos isolados, ao passo que, para os demais antimicrobianos, nenhum comportamento foi destacado. Os resultados não indicaram tendência de aumento da resistência dos isolados de Staphylococcus spp. para a maioria dos antimicrobianos testados. Contudo, é necessário monitorar os padrões de resistência destes patógenos, a fim de que estes fármacos sejam preservados para garantir uma reserva terapêutica.

Echinococcus granulosus sensu lato and Taenia hydatigena in pig in southern Brazil / Echinococcus granulosus sensu lato e Taenia hydatigena em suínos no sul do Brasil

This study aimed to identify the parasitical etiologic agents of visceral cysts in pigs from the central/northern region of Rio Grande do Sul State, Brazil. Fifty-eight cysts were found in livers during veterinary inspection of swine slaughtered from January 2008 to 2012. Collected samples were submitted to macroscopic and molecular analyzes. Polymerase chain reaction (PCR), DNA sequencing and BLAST alignment of sequences was used to molecular characterization of the samples. By PCR 10.3% (6/58) of tested samples were positive for Echinococcus granulosus sensu lato and 56.9% (33/58) for Cysticercus tenuicollis. In this study, it was verified the occurrence of larval forms of E. granulosus sensu lato and Taenia hydatigena in pig herds from the central/northern region of Rio Grande do Sul State. The presence of both parasites is relevant due to the economic losses for the meat industry. Additionally, E. granulosus sensu lato has zoonotic importance and may be infecting pig herds in southern Brazil.

Neste estudo, buscou-se identificar os agentes etiológicos de origem parasitária em cistos nas vísceras de suínos oriundos sa região centro/norte do sEstado do Rio Grande do Sul, Brasil. Cinquenta e oito cistos foram encontrados durante a inspeção veterinária em fígados de suínos abatidos entre janeiro de 2008 a 2012. As amostras foram submetidas às análises macroscópicas e moleculares. Reação em cadeia da polimerase (PCR), sequenciamento de DNA e alinhamento das sequências no BLAST (bases de dados do GenBank) foram utilizados na caracterização molecular das amostras. Das amostras analisadas, 10,3% (6/58) foram positivas para Echinococcus granulosus sensu lato e 56,9% (33/58) para Cysticercus tenuicollis. Evidenciou-se a ocorrência de larvas de E. granulosus sensu lato e Taenia hydatigena em rebanhos suínos na região centro/norte do RS. A presença de ambos os agentes é relevante devido às perdas econômicas para a indústria de carnes. Além disso, destaca-se que E. granulosus sensu lato possui importância zoonótica e pode contaminar os rebanhos suínos no sul do Brasil.

Susceptibility profile of Brazilian Rhodococcus equi isolates against azithromycin, clarithromycin and erythromycin / Perfil de susceptibilidade de isolados brasileiros de Rhodococcus equi frente à azitromicina, claritromicina e eritromicina

Rhodococcus equi infection treatment is usually a macrolide (azithromycin - AZM, clarithromycin - CLR and erythromycin - ERY) and rifampicin combination. However, resistance cases have been reported, especially for ERY. In view of the need of a study about Brazilian isolates susceptibility profile, this study aimed to characterize the minimum inhibitory concentration (MIC) of the macrolides - AZM, CLR and ERY - against 44 R. equi isolates. It was found all isolates CLR and AZM sensitive; however, for ERY, 27% (12/44) were classified as intermediate sensitivity. R. equi Brazilian isolates used here showed a large susceptibility profile, except against ERY, for which it was observed some resistance evidence. In order to avoid failures in the equine rhodococcosis therapy it was highlighted the importance of microbiological culture and antimicrobial susceptibility testing in vitro before beginning treatment.

No tratamento de infecções por R. equi, usualmente emprega-se uma combinação de macrolídeos (azitromicina - AZI, claritromicina - CLARI e eritromicina - ERI) e rifampicina. Todavia, casos de resistência frente a esses antimicrobianos vêm sendo reportados, especialmente à ERI. Tendo em vista a necessidade de um estudo sobre o perfil de susceptibilidade de isolados brasileiros, buscou-se verificar a concentração inibitória mínima (CIM) de AZI, CLARI e ERI frente a 44 isolados de R. equi de diferentes origens. Todos os isolados analisados demonstraram perfil de sensibilidade à AZI e CLARI; em contraste, frente à ERI, 27% (12/44) apresentaram sensibilidade intermediária. A fim de evitar falhas no tratamento da rodococcse equina, destaca-se a importância da cultura microbiológica e a realização de testes in vitro de susceptibilidade antimicrobiana de R .equi antes do início do tratamento.

Genotypic and phenotypic detection of efflux pump in Rhodococcus equi

The req_39680 gene, associated to a putative efflux system, was detected in 60% (54/90) of R. equi isolates by PCR. The phenotypic expression of efflux mechanism was verified in 20% of the isolates using ethidium bromide. For the first time, the expression of efflux mechanism was demonstrated in R. equi.

Detection of anti: Rickettsia spp. antibodies in domestic chickens of extensive breeding in an endemic area for spotted fever in the state of Rio Grande do Sul, Brazil / Detecção de anticorpos anti: Rickettsia spp. em galinhas domésticas de criação extensiva em uma área endêmica para febre maculosa no estado do Rio Grande do Sul, Brasil

The goal of this study was to investigate anti-Rickettsia spp. antibodies in sera of domestic chickens (Gallus gallus domesticus) of extensive breeding in Cerro Largo county, considered an endemic area for spotted fever in the State of Rio Grande do Sul, Brazil. Three hundred blood samples were collected and anti-Rickettsia spp. antibodies were evaluated by indirect immunofluorescence assay (IFA) in the sera obtained. The occurrence of anti-Rickettsia spp. antibodies detected in this study was 1.33% (4/300), with endpoint titers ranging from 64 to 256 for Rickettsia rickettsiii, R. parkeri and/or R. bellii. The results suggest these domestic chickens do not participate as a reservoir and/or amplifying host in the epidemiology of spotted fever in that endemic area. The present study consists in the first serological survey in Gallus gallus domesticus to Rickettsiae-spotted fever group in Brazil.

Este estudo teve como objetivo pesquisar anticorpos anti-Rickettsia spp. em soros de galinhas domésticas (Gallus gallus domesticus) de criação extensiva, provenientes de área considerada endêmica para febre maculosa no estado do Rio Grande do Sul. Foram coletadas 300 amostras de sangue e os soros obtidos foram testados para anticorpos anti-Rickettsia spp. pela Reação de Imunofluorescência Indireta (RIFI). A ocorrência de anticorpos anti-Rickettsia spp. observada foi de 1,33% (4/300), com títulos variando de 64 a 256 para Rickettsia rickettsii, Rickettsia parkeri e/ou Rickettsia bellii. Os resultados sugerem que essas galinhas domésticas não participam como reservatório e/ou hospedeiro amplificador na epidemiologia da febre maculosa na área endêmica. O presente estudo consiste na primeira pesquisa sorológica em Gallus gallus domesticus para rickettsia do grupo da febre maculosa no Brasil.

Ocorrência de parasitos gastrointestinais e fatores de risco de parasitismo em gatos domésticos urbanos de Santa Maria, RS, Brasil / Occurrence of gastrointestinal parasites and parasitism risk factors in domestic cats in Santa Maria, RS, Brazil

Neste trabalho, verificou-se a ocorrência de parasitos gastrointestinais em gatos urbanos domiciliados no município de Santa Maria, RS, no período de março a junho de 2011. Além disso, foram avaliados os fatores de riscos relacionados com a infecção dos parasitos gastrointestinais. Coletou-se 191 amostras de fezes de felinos para a realização de exames coproparasitológico e aplicado um questionário epidemiológico aos proprietários, contendo questões relativas aos hábitos e manejo dos seus animais. Das amostras fecais analisadas, 47,1% (90/191) foram positivas para um ou mais parasitas gastrointestinais, sendo 33,5% (64/191) identificadas como mono-infecção e 13,6% (26/191) como multi-infecção. Toxocara spp. (18,8%) e Giardia spp. (4,2%) foram os principais parasitos encontrados na mono-infecção. Na multi-infecção, as principais associações de parasitos detectadas incluíram: Ancylostoma spp. + Toxocara spp. (3,1%) e Cystoisospora spp. + Cryptosporidium spp. + Giardia spp. + Toxoplasma spp. + Toxocara spp. (1,5%). Os dados epidemiológicos foram submetidos ao teste qui-quadrado, Fischer, análise da relação de chances (OR), também analisada a relação entre os diferentes fatores epidemiológicos e a presença de parasitos gastrointestinais (P>0,05). Os principais fatores de risco identificados foram: a escolaridade dos proprietários e a frequência de realização de tratamentos antiparasitários, os quais exerceram influência direta na ocorrência de parasitos gastrointestinais. Os dados obtidos contribuem para o conhecimento da epidemiologia das parasitoses gastrointestinais, bem como poderão auxiliar médicos veterinários e proprietários na elaboração de estratégias de controle e profilaxia antiparasitária para gatos domésticos.

This study verified the gastrointestinal parasites occurrence in household cats in Santa Maria, RS, Brasil from March to June, 2011. In addition, the risk factors associated with gastrointestinal parasites infection were evaluated. One hundred ninety -one felines fecal samples were submitted to parasitological examination, as well as to an epidemiological questionnaire about the management and the animal habits, which was applied to the owners. Fecal samples were positive for one or more gastrointestinal parasites (47.1% - 90/191). Occurrence of mono-infection was 33.5% (64/191) and multi-infection 13.6% (26/191). Toxocara spp. (18.8%) and Giardia spp. (4.2%) were the main parasites found in mono-infection. The main association of parasites detected included: Ancylostoma spp. + Toxocara spp. (3.1%) and Cystoisospora spp. + Cryptosporidium spp. + Giardia spp. + Toxoplasma spp. + Toxocara spp. (1.5%). Epidemiological data were submitted to chi-square, Fisher and odds ratio tests, as well as analyzed the relationship between the epidemiological factors and the presence of gastrointestinal parasites (P>0.05). The main risk factors identified were: the scholar level of owners and frequency of antiparasitic treatments, which showed a direct influence on the occurrence of gastrointestinal parasites. The data contribute to the understanding of the epidemiology of gastrointestinal parasites and could aid veterinarians and owners in developing of antiparasitic strategies for domestic cats.

Perfil de suscetibilidade antimicrobiana e presença do gene vapA em Rhodococcus equi de origem humana, ambiental e equina / Susceptibility profile of Brazilian Rhodococcus equi isolates to different antimicrobial classes and the presence of vapA gene

Rhodococcus equi é um micro-organismo intracelular facultativo, agente etiológico da rodococose, uma importante enfermidade que acomete principalmente potros com menos de seis meses de idade, causando a morte geralmente em decorrência de lesões pulmonares. Este agente também tem potencial zoonótico e emergiu como um patógeno oportunista no mundo, acometendo humanos imunocomprometidos, especialmente os transplantados e infectados pelo vírus da imunodeficiência humana (HIV). Entretanto, infecções por R. equi em hospedeiros hígidos tem sido relatadas, principalmente em crianças e idosos. Estudos tem mostrado um nível crescente na resistência de isolados de R. equi em relação aos antimicrobianos comumente utilizados no tratamento de animais e seres humanos infectados por este agente. A virulência deste pode estar associada a fatores como a cápsula de polissacarídeo, fosfolipase C e à enzima colesterol oxidase (fator equi). No entanto, uma proteína localizada em um plasmídeo, designada vapA, é essencial para a sobrevivência e replicação do agente em macrófagos. Com isso, os objetivos deste estudo foram avaliar o perfil de suscetibilidade de isolados de R. equi de diferentes fontes em relação aos antimicrobianos mais comumente utilizados na terapêutica animal e humana, bem como verificar a associação entre a presença do gene vapA e o índice de resistência múltipla aos antimicrobianos (IRMA). Neste estudo, 67 isolados brasileiros de R. qui de diferentes fontes foram analisados: 30 provenientes de amostras clínicas de equinos, sete de humanos e 30 ambientais (seis do solo e 24 de fezes de equinos). Para avaliar o perfil de suscetibilidade dos isolados utilizou-se o método de disco difusão, sendo testadas 16 drogas de diferentes classes de antimicrobianos. As amostras clínicas de equinos apresentaram as maiores taxas de resistência à penicilina (86,7%) e lincomicina (30%). Além disso, foram também resistentes a macrolídeos (azitromicina a 6,7%, eritromicina a 6% e ...

Rhodococcus equi is a facultative intracellular bacterium and etiological agent of rodococosis, an important disease that affects specially foals under six months old and leading the death generally due to pulmonary lesions. R. equi also has zoonotic potential, and it has emerged as an opportunistic pathogen in the world, specially infecting solid organ transplant recipients and immunocompromised human patients, mainly those infected by human immunodeficiency virus (HIV). Additionally, R. equi infections by healthy hosts have been reported principally in children and elderly individuals. Studies have shown an increasing level of resistance of isolates of R. equi against antibiotics commonly used to treat affected animals and humans. The virulence of this agent is associated with a protein located on a plasmid, designated vapA, it is essential for survival and replication of R. equi within macrophages. The present study evaluated the susceptibility profile of R.equi isolates from different sources against the antimicrobials most commonly used to treat animals and humans, as well as the occurrence and association of vapA gene and the antimicrobial multiple resistance index (AMRI). Sixty-seven Brazilian isolates of R. equi from different sources were analyzed: 30 clinical samples of horses, seven of human and 30 of environmental (six from soil and 24 from horse feces). To evaluate the susceptibility profile of R. equi isolates, the Kirby Bauer method was performed by using 16 drugs of 11 distinct antimicrobials classes. Additionally, those samples were also resistant to macrolides (azithromycin 6.7%, erythromycin 6% and clarithromycin 3.3%) as well as rifamycin (13%). All human and environmental samples were sensitive to macrolides and rifamycin. However, environmental isolates demonstrated high levels of resistance to penicillin and chloramphenicol. Similarly, human isolates had high level of resistance to ceftiofur, lincomycin and sulfazotrim. AMRI...

Princípios de biossegurança aplicados aos laboratórios de ensino universitário de microbiologia e parasitologia / Principles of biosafety applied to microbiology and parasitology laboratories in universities

Os laboratórios de ensino de microbiologia e parasitologia nas universidades brasileiras são ambientes em que as atividades integradas, envolvendo ensino, pesquisa e extensão, demandam a convivência de pessoas, agentes e amostras biológicas, equipamentos, reagentes e resíduos num mesmo espaço, sendo inevitável a exposição das pessoas aos diferentes riscos. As atividades realizadas nesses laboratórios necessitam empregar as normas de segurança; pois, uma vez que o fator humano é susceptível aos acidentes, os programas de educação em biossegurança são imprescindíveis. Entretanto, para que esses programas sejam efetivos, é necessário que os usuários estejam devidamente informados acerca dos princípios de biossegurança, bem como aptos a colocá-los em prática de maneira correta, a fim de garantir a segurança dos profissionais, acadêmicos e do meio ambiente. Esta revisão compila os principais aspectos da biossegurança relacionados aos princípios e à classificação dos riscos, dos agentes biológicos e dos níveis de contenção laboratorial, bem como aborda as boas práticas laboratoriais nos laboratórios de ensino, pesquisa e extensão em microbiologia e parasitologia.

The teaching laboratories of microbiology and parasitology in Brazilian universities are places where the integrated activities of teaching, research and extension are performed and require the coexistence in the same space, persons, biological agents and samples, equipment, reagents and waste, and where is inevitable the exposure of people to the different risks. The laboratorial activities practiced in Brazilian universities require the need for safety standards, since the human factor is likely the causes of accidents in laboratories, educational programs in biosafety become indispensable to the prevention of risks. However, for an education program become effective is necessary that the users are fully informed about the biosafety principles, as well as able to practice them properly to ensure the safety of all professionals, academics and the environment. This article compiles the main aspects related to the principles of biosafety, risk classification of biological agents and levels of biocontainment, and addresses the issues regarding safety equipment and good laboratory practices applied to the teaching laboratories in microbiology and parasitology.

Fatores epidemiológicos do dengue na região central do estado do Rio Grande do Sul, Brasil, 2007 - 2010 / Epidemiological features of dengue in the central region of Rio Grande do Sul state, Brazil, from 2007 to 2010

O objetivo deste estudo foi avaliar fatores epidemiológicos do dengue, nos municípios da 4ª Coordenadoria Regional de Saúde/RS (4a CRS/RS), nos anos de 2007 a 2010. Trata-se de um estudo descritivo, empregando como variáveis: município de notificação; ano de notificação; sexo e faixa etária do paciente; índice de infestação predial (IIP) e índice de Breteau (IB). Foram constatados 13 casos importados da doença, em cinco municípios, sendo a maior ocorrência em Santa Maria. Houve notificação de casos em ambos os sexos e em diferentes faixas etárias. Focos positivos do Aedes aegypti foram encontrados em armadilhas instaladas em pontos estratégicos de Santa Maria e Santiago. O IIP e IB, em ambos os municípios, não representaram risco à saúde pública. Conclui-se, portanto, que as ações de vigilância em saúde devem ser fomentadas com o objetivo de orientar as práticas de controle do vetor, bem como promover a educação sanitária e ambiental, a fim de impedir a instalação de casos autóctones nos municípios estudados.

The aim of this study was to evaluate the epidemiological issues of dengue in the counties of the 4th Coordenadoria Regional de Saúde (government agency to surveillance on public health) of Rio Grande do Sul state, Brazil, during 2007 to 2010. This is a descriptive study, using as variables: cities where dengue was reported; year; sex and age of the patient; infestation (IIP) and Breteau (BI) index. A total of 13 imported cases of the dengue was reported in five cities and higher occurrence was in Santa Maria city. There were notifications of dengue in both sex and in different age groups. Positive foci of Aedes aegypti were found in the traps at strategic points in both cities, Santa Maria and Santiago. BII and BI varied during the studied period in both cities, and, so far, they did not constitute a risk to public health. We conclude that the health surveillance should be enhanced with the purpose of guiding vector control practices, as well as promote health and environmental education in order to prevent the installation of autochthonous dengue cases in the cities studied.